Ultra Nuclease GMP-grade
Kataloški broj: HC2016A
UltraNuclease GMP-grade se eksprimira i pročišćava u Escherichia coli (E.coli) genetski modificiranim i pripremljenim u GMP okruženjima.Može smanjiti viskoznost staničnog supernatanta i staničnog lizata u znanstvenim istraživanjima, povećati učinkovitost pročišćavanja proteina i poboljšati funkcionalna istraživanja proteina.Proizvod također može smanjiti ostatke nukleinske kiseline domaćina na pg-grade, poboljšavajući učinkovitost i sigurnost bioloških proizvoda za primjenu uključujući pročišćavanje virusa, proizvodnju cjepiva i farmaceutsku proizvodnju proteina/polisaharida.Osim toga, proizvod se također može primijeniti za sprječavanje nakupljanja mononuklearnih stanica ljudske periferne krvi (PBMC) u staničnoj terapiji i razvoju cjepiva.
UltraNuclease se isporučuje u obliku steriliziranog reagensa, eluiranog u puferu (20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glicerin), s izgledom bezbojne, prozirne tekućine.Ovaj proizvod proizveden je prema zahtjevima GMP procesa i dostupan je u tekućem obliku.
Komponente
UltraNuclease GMP-grade (250 U/μL)
Uvjeti skladištenja
Proizvod se isporučuje sa suhim ledom i može se čuvati na -25℃~-15°C dvije godine.
Ako je proizvod otvoren i pohranjen na 4 ℃ dulje od tjedan dana, preporučujemo filtriranjeproizvod za sprječavanje mikrobne kontaminacije.
Tehnički podaci
| Domaćin izraza | Rekombinantna E. coli s UltraNuclease genom |
| Molekularna težina | 26,5 kDa |
| soelektrična točka | 6.85 |
| Čistoća | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Međuspremnik za pohranu | 20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glicerin |
|
Definicija jedinice | Definicija jedne jedinice aktivnosti (U) je količina enzima koja se koristi zapromijeniti vrijednost apsorpcije ΔA260 za 1,0 u 30 minuta u 2,625 mLreakcijski sustav na 37 ℃ s pH 8,0 (ekvivalent potpunoj probavi37 μg DNA sperme lososa u oligonukleotide). |
upute
1. Uzorak Kolekcija
Prilijepljene stanice: uklonite medij, isperite stanice PBS-om i uklonite supernatant.
Suspenzija stanica: sakupite stanice centrifugiranjem, isperite stanice PBS-om, centrifugirajte na 6000okretaja u minuti 10 min, sakupite pelet.
Escherichia coli: sakupite bakterije centrifugiranjem, isperite jednom PBS-om, centrifugirajte na 8000okretaja u minuti tijekom 5 minuta i sakupite pelet.
2. Obrada uzorka
Tretirajte prikupljene stanične pelete puferom za lizu u omjeru mase (g) prema volumenu (mL) 1:(10-20), ili mehaničkim ili kemijskim metodama na ledu ili na sobnoj temperaturi (1 g stanične pelete sadrži oko
109 stanica).
3. Liječenje enzimima
Dodajte 1-5 mM MgCl u reakcijski sustav i podesite pH na 8-9.
Dodajte UltraNuclease u omjeru od 250 jedinica za probavu 1 g staničnih peleta, inkubirajte na 37 ℃ više od 30 minuta.Pogledajte obrazac "Preporučeno vrijeme reakcije" kako biste odabralitrajanje tretmana.
4. Supernatant Kolekcija
Centrifugirajte na 12 000 okretaja u minuti 30 minuta i prikupite supernatant.
Napomena: Ako je otopina kisela ili alkalna, ili sadrži visoke koncentracije soli, deterdženata ilidenaturanse, povećajte dozu enzima ili produžite vrijeme tretmana u skladu s tim.
Preporučeni uvjeti reakcijeuključenja
| Parametar | Optimalno stanje | Učinkoviti regenerator |
| Mg²+koncentracija | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 (prikaz, ostalo). | 6-10 (prikaz, stručni). |
| Temperatura | 37 ℃ | 0-42 ℃ |
| DTT koncentracija | 0-100 mM | >0 mM |
| Koncentracija merkaptoetanola | 0-100 mM | >0 mM |
| Koncentracija monovalentnih kationa | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Koncentracija fosfata | 0-10 mM | 0-100 mM |
Preporučeno Reakcija Vrijeme (37 ℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Količina ultranukleaze (konačna koncentracija) | Vrijeme reakcije |
| 0,25 U/mL | >10 h |
| 2,5 U/mL | >4h |
| 25 U/mL | 30 min |
Bilješke:
Nosite potrebnu osobnu zaštitnu opremu, poput laboratorijske kute i rukavica, kako biste osigurali svoje zdravlje i sigurnost!
