Multiplex RT-qPCR premiks u jednom koraku
Opis
Kataloški broj: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix je multiplex kvantitativni PCR komplet koji se temelji na RNA kao predlošku.U eksperimentu se reverzna transkripcija i kvantitativni PCR izvode u istoj reakcijskoj epruveti, čime se pojednostavljuje rad eksperimenta i smanjuje rizik od kontaminacije.Jedinstveni dizajn pufera i mješavine enzima može se koristiti u liofiliziranom sustavu u jednom koraku.Komplet koristi reverznu transkriptazu otpornu na toplinu za učinkovitu sintezu prvog lanca cDNA korištenjem hotstart Taq DNA polimeraze za kvantitativno pojačanje.Sadrži optimizirani reakcijski pufer, mješavinu enzima itd., a dodani su i čimbenici koji učinkovito inhibiraju nespecifičnu PCR amplifikaciju i povećavaju učinkovitost amplifikacije višestrukih qPCR reakcija, omogućujući višestruko fluorescentno kvantitativno amplifikaciju uz osiguravanje učinkovitosti amplifikacije početnica.
Komponente
| Ime |
| 1. Lio-pufer |
| 2. Mješavina lio-enzima |
| 3. Lio zaštitnik |
Uvjet prijevozaion
O: Lio-pufer i zaštitnik: -25~-15 ℃, rok trajanja je 1 godina.
B: Lio-enzimska mješavina, 2-8 ℃, rok trajanja 6 mjeseci.
Uputa za rad
1. Reakcijski sustav (uzmite 25 μL kao primjer)
| Komponente | Volumen (μL) | Konačna koncentracija |
| Lio-pufer | 6 | 1* |
| Lio-enzimska mješavina | 1 | - |
| Lyo-Protectant | 8 | - |
| Mješavina temeljnog premaza (10 μM) | 1 | 0,1-1 uM |
| Mješavina sonde (10 μM) | 0,5 | 0,05-0,5 uM |
| RNA predložak | 5 | - |
| DEPC H2O | Do 25 | - |
2. Optimizirani biciklistički protokol
1) Standardni biciklistički protokol
| Stadij reakcije | Temperatura | Vrijeme | Ciklus | |
| 1 | Obrnuta transkripcija | 50°Ca | 10 min | 1 |
| 2 | Početna denaturacija | 95°C | 5 minuta | 1 |
| 3 | Reakcija pojačanja | 95°C | 15 sekundi | 45 ciklusa |
| 60°Cb | 30 sekundic |
2) Protokol brze vožnje
|
| Stadij reakcije | Temperatura | Vrijeme | Ciklus |
| 1 | Obrnuta transkripcija | 50°Ca | 2 min | 1 |
| 2 | Početna denaturacija | 95°C | 2 sekunde | 1 |
| 3 | Reakcija pojačanja | 95°C | 1 sek |
45 ciklusa |
| 60°Cb | 13 sekundic |
Bilješka:
a) Obrnuto transkripcija: Temperatura može odabrati 42°C ili 50°C 10-15 minuta.
b) Reakcija pojačanja: Temperatura se podešava prema Tm vrijednosti dizajniranih temeljnih premaza.
c)Fluorescencija signal stjecanje: Postavite eksperimentalni postupak u skladu sa zahtjevimapriručnik za instrumente.
Tehničke informacije/Specifikacije
| Vrući početak | Ugrađen vrući start |
| Metoda detekcije | Detekcija temeljnom sondom |
| PCR metoda | RT-qPCR u jednom koraku |
| Vrsta uzorka | RNA |
Bilješke
1. Ovaj proizvod je samo za istraživačku upotrebu.
2. Nosite potrebnu OZO, kao što je laboratorijska kuta i rukavice, kako biste osigurali svoje zdravlje i sigurnost！
