RT-LAMP Colormetric (liofilizirana kuglica)
Ovaj proizvod sadrži reakcijski pufer, RT-Enzymes Mix (Bst DNA polimeraza i reverzna transkriptaza otporna na toplinu), liofilizirane zaštitne tvari i komponente kromogene boje.Proizvod je liofilizirani kuglični, koristi se samo s primerima i predlošcima.Ovaj komplet pruža brzu, jasnu vizualnu detekciju pojačanja, pri čemu je negativna reakcija označena crvenom bojom, a pozitivna reakcija označena je promjenom u žuto.
komponenta
RT-LAMP Colormetric Master Mix (liofilizirane kuglice)
Prijave
Za izotermno pojačanje DNA ili RNA.
Uvjeti skladištenja
Transportira se i skladišti na 2 ~ 8 ℃.Proizvod vrijedi 12 mjeseci.
Protokol
1.Izvadite odgovarajući broj liofiliziranih kuglica u prahu prema broju testova.
2.Pripremite reakcijsku smjesu
komponenta | Volumen |
RT-LAMP Colormetric Master Mix (liofilizirane kuglice) | 1 komad (2 perlice) |
10 × mješavina temeljnog premazaa | 5 μL |
Predlošci DNA/RNA b | 45 μL |
Bilješke:
1. Koncentracija mješavine 10×Primer: 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B;
2. Preporučuje se otapanje šablona nukleinskih kiselina pomoću DEPC vode.
3.Inkubirajte na 65°C 30-45 minuta, što se može odgovarajuće produžiti u skladu s promjenom boje. Vrijeme reakcije.
4.Sudeći golim okom, žuto je bilo pozitivno, a crveno negativno.
Bilješke
1.Reakcijska temperatura može se optimizirati između 62 ℃ i 68 ℃ prema stanju temeljnog premaza.
2.Zapakirani reagensi ne smiju biti izloženi zraku dulje vrijeme.
3.Reakcija promjene boje u crveno i žuto ovisi o pH promjeni reakcijskog sustava, nemojte koristiti otopinu za skladištenje Tris nukleinske kiseline koja sadrži, preporučuje se upotreba ddH2O pohranjena nukleinska kiselina.
4.Pokus se provodi na standardiziran način, uključujući pripremu reakcijskog sustava, obradu uzorka i dodavanje uzorka.
5.Predlaže se pripremiti reakcijski sustav u ultra-čistom stolu i dodati predloške u dimnjaku drugih prostorija kako bi se izbjegla laž.