Bst 2.0 DNA polimeraza (bez glicerola, visoke gustoće)
Bst DNK polimeraza V2 izvedena je iz Bacillus stearothermophilus DNK polimeraze I, koja ima aktivnost 5′→3′ DNK polimeraze i jaku aktivnost zamjene lanca, ali nema aktivnost 5′→3′ egzonukleaze.Bst DNA polimeraza V2 idealno je prikladna za pomicanje niti, izotermno pojačanje LAMP (izotermno pojačanje posredovano petljom) i brzo sekvenciranje.Ova Bst DNA polimeraza V2 sposobna je inhibirati aktivnost DNA polimeraze na sobnoj temperaturi, tako da može raditi i reakcijski sustav se može formulirati na sobnoj temperaturi, sprječavajući nespecifično pojačanje i poboljšavajući učinkovitost reakcije, a ova verzija može biti liofiliziran.Osim toga, sposoban je otpustiti svoju aktivnost na povišenim temperaturama, čime se eliminira potreba za posebnim korakom aktivacije.
Komponente
| komponenta | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA polimeraza V2 (bez glicerola) (32U/μL) | 0,05 mL | 0,25 mL | 2,5 mL |
| 10×HC Bst V2 međuspremnik | 1,5 mL | 2×1,5 mL | 3×10 ml |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 mL | 2×1,5 mL | 2×10 mL |
Prijave
1.LAMP izotermno pojačanje
2.Reakcija premještanja jednog lanca DNA
3.Visoko GC sekvenciranje gena
4.Sekvenciranje DNA nanogramske razine.
Uvjet skladištenja
Prijevoz ispod 0°C i skladištenje na -25°C~-15°C.
Definicija jedinice
Jedna jedinica definirana je kao količina enzima koja inkorporira 25 nmol dNTP-a u materijal netopljiv u kiselini u 30 minuta na 65°C.
Reakcija LAMPE
| Komponente | 25 μLSustav |
| 10×HC Bst V2 međuspremnik | 2,5 μL |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 μL |
| dNTP (10 mM svaki) | 3,5 μL |
| SYTO™ 16 zelena (25×)a | 1,0 μL |
| Mješavina temeljnog premazab | 6 μL |
| Bst DNA polimeraza V2 (bez glicerola) (32 U/uL) | 0,25 μL |
| Predložak | × μL |
| ddH₂O | Do 25 μL |
Bilješke:
1) a.SYTOTM 16 Green (25×): Prema eksperimentalnim potrebama, druge boje se mogu koristiti kao zamjene;
2) b.Mješavina primera: dobivena miješanjem 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB i drugih volumena.
Reakcija i stanje
1 × pufer HC Bst V2, temperatura inkubacije je između 60°C i 65°C.
Inaktivacija toplinom
80°C, 20 min.
