2×PCR glavna mješavina (bez boje)
PCR Master Mix je vrsta konvencionalne prethodno pomiješane otopine za PCR koja je spremna za upotrebu, uključujući Taq DNA polimerazu, dNTP mješavinu MgCl2 i optimizirani pufer.Tijekom reakcije mogu se dodati samo primer i šablona za pojačanje, što uvelike pojednostavljuje korake rada eksperimenta.Ovaj proizvod sadrži izvrsne stabilizatore i može se čuvati 3 mjeseca na 4 ℃.PCR produkt ima 3′-dA izbočenje i može se lako klonirati u T vektor.
Uvjeti skladištenja
Proizvod treba čuvati na -25 ℃ ~ -15 ℃ dvije godine.
Tehnički podaci
| Vjernost (naspram Taq) | 1× |
| Vrući početak | No |
| Prevjes | 3′-A |
| polimeraza | Taq DNA polimeraza |
| Format reakcije | SuperMix ili Master Mix |
| Brzina reakcije | Standard |
| Vrsta proizvoda | PCR glavna mješavina (2×) |
upute
1.Reakcijski sustav
| Komponente | Veličina (μL) |
| Predložak DNK | Prikladan |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| PCR glavna mješavina | 25 |
| ddH2O | do 50 |
2.Protokol pojačanja
| Ciklus koraka | Temperatura (°C) | Vrijeme | Ciklusi |
| Preddenaturacija | 94 ℃ | 5 minuta | 1 |
| Denaturacija | 94 ℃ | 30 sek | 35 |
| Žarenje | 50-60 ℃ | 30 sek | |
| Proširenje | 72 ℃ | 30-60 sekundi/kb | |
| Završni nastavak | 72 ℃ | 10 minuta | 1 |
Bilješke:
1) Upotreba predloška: 50-200 ng genomske DNA;0,1-10 ng plazmidne DNA.
2) Mg2+koncentracija: Ovaj proizvod sadrži 3 mM MgCl2 prikladnog za većinu PCR reakcija.
3) Temperatura žarenja: Molimo pogledajte teorijsku Tm vrijednost primera.Temperatura žarenja može se postaviti na 2-5 ℃ nižu od teorijske vrijednosti temeljnog premaza.
4) Vrijeme produženja: Za molekularnu identifikaciju preporučuje se 30 s/kb.Za kloniranje gena, 60preporuča se sek/kb.
Bilješke
1.Radi vaše sigurnosti i zdravlja, molimo da tijekom rada nosite laboratorijske kute i jednokratne rukavice.
2.Samo za istraživačku upotrebu!
