Kit za ekstrakciju virusne DNA/RNA
Ovaj pribor je prikladan za brzu ekstrakciju virusne DNA/RNA visoke čistoće iz uzoraka kao što su nazofaringealni brisevi, brisevi okoline, supernatanti stanične kulture i supernatanti tkivnog homogenata.Komplet se temelji na tehnologiji pročišćavanja silicijevom membranom koja eliminira potrebu za korištenjem organskih otapala fenol/kloroform ili dugotrajnog taloženja alkoholom za ekstrakciju virusne DNA/RNA visoke kvalitete.Dobivene nukleinske kiseline su bez nečistoća i spremne su za upotrebu u nizvodnim eksperimentima kao što su reverzna transkripcija, PCR, RT-PCR, PCR u stvarnom vremenu, sekvenciranje sljedeće generacije (NGS) i Northern blot.
Uvjeti skladištenja
Čuvati na 15 ~ 25 ℃ i transportirati na sobnoj temperaturi
Komponente
| Komponente | 100RXNS |
| Međuspremnik VL | 50 ml |
| Međuspremnik RW | 120 ml |
| ddH2 O bez RNaze | 6 ml |
| FastPure RNA kolone | 100 |
| Tube za prikupljanje (2 ml) | 100 |
| Epruvete za sakupljanje bez RNaze (1 ,5 ml) | 100 |
Međuspremnik VL:Osigurajte okruženje za lizu i vezanje.
Međuspremnik RW:Uklonite ostatke proteina i druge nečistoće.
ddH2O bez RNaze:Eluirajte DNA/RNA s membrane u spin koloni.
Stupci FastPure RNA:Specifično adsorbira DNA/RNA.
Tube za prikupljanje 2 ml:Prikupiti filtrat.
Epruvete za sakupljanje bez RNaze 1,5 ml:Prikupite DNA/RNA.
Prijave
Nazofaringealni brisevi, brisevi okoline, supernatanti stanične kulture i supernatanti tkivnog homogenata.
Samostalno pripremljena Materials
Vrhovi za pipete bez RNaze, epruvete za centrifugiranje bez RNaze od 1,5 ml, centrifuga, vorteks mikser i pipete.
Eksperimentalni proces
Izvršite sve sljedeće korake u biološko sigurnosnom ormariću.
1. Dodajte 200 μl uzorka u epruvetu za centrifugiranje bez RNaze (nadopunite PBS-om ili 0,9% NaCl u slučaju nedovoljne količine uzorka), dodajte 500 μl pufera VL, dobro promiješajte vorteksiranjem 15 – 30 sekundi i centrifugirajte kratko da sakupite smjesu na dnu epruvete.
2. Stavite stupce FastPure RNA u epruvete za prikupljanje od 2 ml.Prenesite smjesu iz Koraka 1 u stupce FastPure RNA, centrifugirajte na 12 000 okretaja u minuti (13 400 × g) 1 minutu i bacite filtrat.
3. Dodajte 600 μl pufera RW u FastPure RNA kolone, centrifugirajte na 12 000 okretaja u minuti (13 400 × g) 30 sekundi i bacite filtrat.
4. Ponovite 3. korak.
5. Centrifugirajte praznu kolonu na 12 000 okretaja u minuti (13 400 × g) 2 minute.
6. Pažljivo prenesite kolone FastPure RNA u nove epruvete za sakupljanje bez RNaze od 1,5 ml (isporučene u kompletu) i dodajte 30 – 50 μl ddH2O bez RNaze u središte membrane bez dodirivanja kolone.Ostavite stajati na sobnoj temperaturi 1 minutu i centrifugirajte na 12 000 okretaja u minuti (13 400 x g) 1 minutu.
7. Odbacite stupce FastPure RNA.DNA/RNA se može koristiti izravno za sljedeće testove ili se može pohraniti na -30~ -15°C na kratko razdoblje ili na -85 ~-65°C na duže razdoblje.
Bilješke
Samo za istraživačku upotrebu.Nije za upotrebu u dijagnostičkim postupcima.
1. Prethodno uravnotežite uzorke na sobnu temperaturu.
2. Virusi su vrlo zarazni.Provjerite jesu li poduzete sve potrebne sigurnosne mjere prije eksperimenta.
3. Izbjegavajte opetovano zamrzavanje i odmrzavanje uzorka jer to može dovesti do degradacije ili smanjenog prinosa ekstrahirane virusne DNA/RNA.
4. Oprema koju ste sami pripremili uključuje vrhove za pipete bez RNaze, centrifugalne epruvete bez RNaze od 1,5 ml, centrifugu, vorteks mikser i pipete.
5. Kada koristite komplet, nosite laboratorijsku kutu, jednokratne rukavice od lateksa i jednokratnu masku i koristite potrošni materijal bez RNaze kako biste smanjili rizik od kontaminacije RNazom.
6. Izvedite sve korake na sobnoj temperaturi osim ako nije drugačije navedeno.
Mehanizam i tijek rada
