Peroksidaza (izvor hrena) Sinonim: vodikov peroksid oksidoreduktaza;HRP
Opis
Peroksidaza hrena (HRP) izolirana je iz korijena hrena (Amoracia rusticana) i pripada feroprotoporfirinskoj skupini peroksidaza.HRP se lako spaja s vodikovim peroksidom (H2O2).Rezultirajući kompleks [HRP-H2O2] može oksidirati širok raspon donora vodika:
Donator + H2O2 → Oksidirani donor + 2 H2O
HRP će oksidirati različite supstrate (vidi tablicu 1):
• Kromogeni
• Kemiluminiscentni (kao što je luminol ili izoluminol)
• Fluorogeni (kao što je tiramin, homovanilna kiselina ili 4-hidroksifenil octena kiselina)
HRP je jednolančani polipeptid koji sadrži četiri disulfidna mosta.HRP je glikoprotein koji sadrži 18% ugljikohidrata.Sastav ugljikohidrata sastoji se od galaktoze, arabinoze, ksiloze, fukoze, manoze, manozamina i galaktozamina, ovisno o specifičnom izoenzimu.
HRP je široko korištena oznaka za imunoglobuline u mnogim različitim imunokemijskim primjenama, uključujući imunobloting, imunohistokemiju i ELISA.HRP se može konjugirati s antitijelima nekoliko različitih metoda, uključujući glutaraldehid, perjodatnu oksidaciju, preko disulfidnih veza, te također preko amino i tiol usmjerenih poprečnih povezivača.HRP je najpoželjnija oznaka za antitijela, budući da je najmanja i najstabilnija od tri najpopularnija enzimska oznaka (peroksidaza, β-galaktozidaza, alkalna fosfataza) i njegova glikozilacija dovodi do nižeg nespecifičnog vezanja.Objavljen je pregled metoda konjugacije glutaraldehida i perjodata.
Peroksidaza se također koristi za određivanje glukoze4 i peroksida u otopini.Nekoliko publikacija, 6-24 teze, 25-29 i disertacije 30-46 citirale su upotrebu P8375 u svojim istraživačkim protokolima.
Kemijska struktura
Specifikacija
Ispitni predmeti | Tehnički podaci |
Opis | Crvenkastosmeđi amorfni prah, liofiliziran |
Aktivnost | ≥100 U/mg |
Čistoća (SDS-PAGE) | ≥90% |
Topivost (10 mg praha/ml) | Čisto |
Zagađujući enzimi | |
NADH/NADPH oksidaza | ≤0,1% |
Katalaza | ≤0,005% |
ATPaza | ≤0,03% |
Prijevoz i skladištenje
Prijevoz:Isporučuje se ispod 2-8°C
Skladištenje:Čuvati na -20°C (dugotrajno), 2-8°C (kratkotrajno)
Preporučeno ponovno testiranjeŽivot:2 godine