One Step Fast RT-qPCR Probe Premix-UNG
Kataloški broj: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) je komplet za brzo otkrivanje RT-qPCR baziran na sondi prikladan za single-plex ili multiplex kvantitativni PCR koristeći RNA kao predložak (kao što je RNA virus).Ovaj proizvod koristi novu generaciju Taq DNA polimeraze modificirane antitijelima i namjensku reverznu transkriptazu u jednom koraku, s optimiziranim puferom za brzo umnažanje, koji ima veću brzinu umnažanja, veću učinkovitost i specifičnost umnažanja.Podržava uravnoteženo pojačanje u jednom pleksu i multipleksu uzoraka niske i visoke koncentracije u kratkom vremenu.
Komponente
1. 5×RT-qPCR pufer (U+)
2. Mješavina enzima (U+)
Bilješke:
a.5×RT-qPCR pufer (U+) uključuje dNTP i Mg2+;
b.Mješavina enzima (U+) uključuje reverznu transkriptazu, Hot Start Taq DNA polimerazu, inhibitor RNaze i UDG;
c.Koristite vrhove bez RNaze, EP epruvete itd.
Prije upotrebe temeljito promiješajte 5×RT-qPCR pufer (U+).Ako nakon odmrzavanja ima bilo kakvih oborina, pričekajte da se pufer vrati na sobnu temperaturu, promiješajte i otopite, a zatim ih upotrijebite na uobičajen način.
Uvjeti skladištenja
Proizvod se isporučuje sa suhim ledom i može se čuvati na -25~-15 ℃ 1 godinu.
upute
1. Reakcija Sustav
| Komponente | Volumen (20 μL reakcija) |
| 2 ×RT-qPCR pufer | 4 μL |
| Mješavina enzima (U+) | 0,8 μL |
| Primer Naprijed | 0,1 ~ 1,0 μM |
| Primer Revers | 0,1 ~ 1,0 μM |
| TaqMan sonda | 0,05~0,25 μM |
| Predložak | X μL |
| Voda bez RNaze | do 25μL |
Napomene: Reakcijski volumen je 10-50 μL.
2. Biciklistički protokol (Sstandard)
| Ciklus korak | Temp. | Vrijeme | Ciklusi |
| Obrnuta transkripcija | 55 ℃ | 10 min | 1 |
| Početna denaturacija | 95 ℃ | 30 sek | 1 |
| Denaturacija | 95 ℃ | 10 sek | 45 |
| Žarenje/proširenje | 60 ℃ | 30 sek |
| Biciklistički protokol (Brzo) Ciklus korak |
Temp. |
Vrijeme |
Ciklusi |
| Obrnuta transkripcija | 55 ℃ | 5 minuta | 1 |
| Početna denaturacija | 95 ℃ | 5 s | 1 |
| Denaturacija | 95 ℃ | 3 s | 43 |
| Žarenje/proširenje | 60 ℃ | 10 s |
Bilješke:
a.Temperatura obrnute transkripcije je između 50 ℃ do 60 ℃, povećanje temperature pomaže u pojačavanju složenih struktura i predložaka s visokim sadržajem CG;
b.Optimalna temperatura žarenja mora se prilagoditi na temelju Tm vrijednosti primera i odabrati najkraće vrijeme za prikupljanje fluorescentnog signala na temelju instrumenta PCR u stvarnom vremenu.
Bilješke
Nosite potrebnu osobnu zaštitnu opremu, poput laboratorijske kute i rukavica, kako biste osigurali svoje zdravlje i sigurnost!
